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BioLegend流式抗体选择指南

 更新时间:2025-07-29    点击量:42

 一、流式抗体核心选择原则(快准狠?。?/span>  

 1. 按样本物种选克隆号  

物种

推荐抗体来源

明星克隆号举例

小鼠抗人

CD3-UCHT1

小鼠

大鼠抗小鼠

CD4-GK1.5

大鼠

小鼠抗大鼠

CD45-OX1

> ? 避坑:勿用人源化抗体做小鼠实验(交叉反应假阳性)  

 2. 按靶标表达量选荧光染料  

image.png

 3. 按激光器选染料组合  

仪器配置

推荐方案

单激光(488nm

FITC + PE + PerCP

双激光

FITC + PE-Cy7 + APC

四激光

BV421 + PE + APC + Spark NIR780

 

 二、流式抗体3步速选流程图(收藏!)  

image.png 

 三、流式抗体高频问题解决方案  

 1. 信号弱/无信号  

- 对策:  

  1. 检查抗体有效期(≤1年)  

  2. 增加抗体浓度(常规1:100 → 1:50)  

  3. 改用高亮度染料(如FITC→PE)  

 2. 背景噪音高  

- 对策:  

  1. Fc阻断剂(BioLegend 422301)  

  2. 优化破膜时间(胞内染≤30min)  

  3. 设置FMO对照  

  3. 多色串扰严重  

- 对策:  

冲突组合

替代方案

FITC vs PE

改用PerCP

APC vs PE-Cy7

改用APC-Cy7

 

 

 四、万能多色方案模板  

 4色基础版(适合凋亡/周期分析)  

通道

靶标

FITC

Annexin V

PE

CD4

PerCP

CD8

APC

PI/7-AAD

8色免疫分型版(适合T/B/NK分析)  

通道

靶标

BV421

CD3

PE

CD4

APC

CD8

PE-Cy7

CD19

APC-Cy7

CD56

Spark NIR685

CD16

FITC

CD45

PerCP

HLA-DR

 五、流式抗体品牌选购建议  


需求

推荐品牌

明星产品线

高性价比

BioLegend

PureBlk™ 阻断剂

超高灵敏度

BD Biosciences

Horizon™ 染料

稀有靶标

Thermo Fisher

eBioscience™



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