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蛋白质定量有哪些方法？

2023-08-22 蛋白定量是蛋白分离和分析前必须的一个重要步骤，蛋白色谱分离、蛋白质电泳分析、蛋白质免疫分离和分析、细胞裂解释放的总蛋白定量、蛋白分子的标记、蛋白结构分析等，都需要可靠的定量分析作为基础。蛋白定量分析应用的领域包括生物科学，食品检验，临床检验等等。蛋白质定量有哪些方法？让我们一起来看看吧！一、比色法蛋白定量常使用的方法是比色法，通常用于总蛋白的定量分析。根据蛋白和比色试剂的结合，可以将比色法分为：蛋白-染料结合法和蛋白-铜螯合化学试剂法。前者对应的典型蛋白定量比色法是考马斯亮蓝...

WB实验中条带不跑歪的秘诀

2023-08-21 在做Westernblot实验时，你一定会遇到各式各样的条带，最常见的就是条带跑歪了，如凹型条带、凸型条带、斜条带、条带拖尾等。如何更好的做好WB实验，让我们一起来看看WB实验中条带不跑歪的秘诀吧！一、凹凸条带的原因和解决办法可能原因：可能是由于胶未配好（凝胶未能wan全聚合，胶中有颗?；蚱荩何蠢淙春?，），也可能是电压过高。解决方法：正确添加质量合格且未过期的AP及TEMED；过滤配胶的试剂保证配胶过程中胶内无气泡；凝胶冷却好后再上样；降低电压。二、条带出现黑点或黑斑的...

Q-pcr 和 RT-pcr 有啥区别？

2023-08-21 Q-PCR和RT-PCR都是分子生物学中常用的技术，用于检测和定量特定的核酸序列。Q-pcr和RT-pcr有啥区别？它们的原理和应用类型相同吗？今天让我们一起来了解一下吧！一、Q-pcr和RT-pcr原理上的不同Q-PCR也是基于PCR的技术，但它引入了荧光探针或荧光染料来实时监测PCR反应的进程。荧光信号的强度与目标序列的数量成正比，因此可以定量地测量起始样品中的目标核酸数量。RT-PCR结合了逆转录（ReverseTranscription）和聚合酶链式反应（PCR）的过...

PolyPlus转染试剂jetPRIME®产品问题汇总

2023-08-18 问题一：化合物Q：INTERFERin®是什么类型的化合物？A：INTERFERin®是新一代的非脂质体阳离子两性分子转染试剂，专为培养的哺乳动物细胞的siRNA转染而开发。使用INTERFERin®，加入1nM的siRNA就能达到90%以上的沉默效率。问题二：细胞Q:INTERFERin®已成功转染的细胞系有哪些？A:INTERFERin®已被成功用于多种贴壁细胞和非贴壁细胞系，例如HeLa，HEK-293,A549MDA-MB-23...

CRISPR Cas9酶是一种基因编辑工具

2023-08-18 CRISPRCas9酶是一种基因编辑工具，用于修改生物体的基因组。CRISPR(ClusteredRegularlyInterspacedShortPalindromicRepeats)是一种存在于细菌和古细菌中的一类DNA序列，而Cas9(CRISPR-associatedprotein9)是CRISPR系统中的一种酶。从细菌中发现的一种天然的免疫系统，用于抵御病毒入侵。它通过记录病毒的DNA片段，并将其整合到自身的基因组中，形成CRISPR序列。当同一病毒再次入侵时，CR...

原代细胞如何获??？

2023-08-17 原代细胞(primarycell)：是指从机体的组织(如人组织、小鼠组织、大鼠组织和兔组织等)经蛋白酶或其它的方法获得单个细胞并在体外进行模拟机体培养的细胞，称为原代细胞。一般认为，培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。原代细胞的获取难度大、需要考虑的问题多，原代细胞如何获??？原代细胞的获取，就是从活体上将组织分解成单个细胞再进行培养的过程，且整个过程要求无菌操作。具体要考虑的问题有：组织分解的方式，培养的时间，换液时间，细胞状态判断和冻存。一、...

悬浮细胞如何进行传代培养？

2023-08-16 悬浮细胞传代是一项重要的实验操作,它可以帮助研究人员扩增和维持细胞株。悬浮细胞如何进行传代呢？一、悬浮细胞的传代悬浮细胞传代比贴壁细胞传代稍微简单一些。由于细胞已经在生长培养基中悬浮，因此无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离，整个过程较为迅速，对细胞的损伤也较小。悬浮生长细胞的传代培养要比贴壁细胞简单得多，通常有两种方法。1.直接给带传代的培养瓶中补充一定量的新鲜.培养基，然后将进行分装。2.先通过离心弃掉营养匮乏的旧培养基，然后再用适量的新鲜培养基重悬细胞沉淀，最后将其分...

贴壁细胞如何进行传代培养？

2023-08-15 随着CAR-T治疗的火热，细胞和基因治疗也进入了白re化的状态，细胞培养就称为通向CAR-T治疗的第一步。贴壁细胞如何进行传代培养？让我们一起来看看吧！一、所需材料★装有贴壁细胞的培养容器★经过组织培养处理的培养瓶、培养板或培养★wan全生长培养基，预热至37℃★一次性无菌15ml试管★37℃培养箱，充有二氧化碳浓度为5%的湿化空气★平衡盐溶液，例如:杜尔贝科磷酸盐缓冲液(DPBS)，不含钙、镁和酚红消化酶，例如：胰蛋百酶，不含酚红二、贴壁细胞传代流程细胞培养一定要保持工作区...