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原代细胞转染的注意事项有哪些？

2023-10-08 你知道原代细胞转染的注意事项有哪些吗？让我们一起来看看吧！1.选择合适的转染试剂原代细胞对不同的转染试剂有不同的敏感性和稳定性。因此，在选择转染试剂时，需要根据细胞类型和实验需求进行筛选。2.优化细胞密度不同的原代细胞对细胞密度的要求不同，过低或过高的细胞密度可能会影响转染效率。因此，在转染前需要通过培养时间和培养条件等因素来优化细胞密度。3.使用合适的载体选择合适的载体可以提高转染效率和稳定性。常用的载体包括质粒、病毒和RNA。4.优化转染条件优化转染条件可以提高转染效率和...

影响免疫组化（IHC）实验结果的因素有哪些？

2023-10-08 免疫组化技术是利用已知的特异性抗体或抗原能特异性结合的特点，通过化学反应使标记于结合后的特异性抗体上的显示剂通过借助显微镜的观察，从而在抗原抗体结合部位确定组织细胞结构的一门组化技术。那么影响免疫组化实验结果的因素有哪些呢？让我们一起来看看吧！一、组织的固定组织固定的好坏直接影响免疫组化的结果，选择良好的固定液并及时充分的固定可以防止组织自溶，最大限度保留组织的抗原性，保证免疫组化结果的准确性。常用固定液：10%的中性缓冲福尔马林（40%甲醛10ml+0.01mol/LPBS...

影响免疫荧光（IF）实验结果的因素有哪些？

2023-10-08 免疫荧光染色技术是一种以免疫学为基础，结合生物化学技术和显微技术发展而来的蛋白等分子检测技术。那么你知道影响免疫荧光（IF）实验结果的因素有哪些吗？让我们一起来看看吧！一、免疫荧光染色方法的选择免疫荧光染色技术分为直接法和间接法。直接法：将荧光标记物偶联在抗原/抗体上，直接与相应的抗体/抗原反应。间接法：先用未标记的一抗与抗原充分反应后，再利用荧光标记的二抗与已经结合在抗原上的一抗结合，达到检测抗原的目的。优点缺点直接法操作简单、特异性高，非特异性染色少便于相同宿主来源的不同...

影响ELISA结果的因素有哪些？

2023-10-08 ELISA酶联免疫吸附试验是目前临床上zui常用的免疫学检验方法，由于其试剂稳定，易保存，操作简便，结果判断较客观，既适宜于大规模筛查试验，又可用于少量标本的检测，既可以做定性试验也可以做定量分析，目前已广泛用于微生物学、寄生虫学、肿瘤学和细胞因子检测等领域。那么你知道影响ELISA结果的因素有哪些吗？让我们一起来看看吧！一、样品样品是检测的前提，样品质量会直接影响实验结果?？梢杂肊LISA来检测的样品很多，根据检测项目不同可以是血清、血浆、唾液、尿液等，但大部分还是以血清为...

RNA提取的注意事项有哪些？

2023-10-07 RNA是目前发现细胞内生物功能zui丰富多样的生物大分子，同时是DNA与蛋白质信息传递的桥梁，因此完整RNA的提取和纯化是功能基因组时代的重要手段。那么你知道RNA提取的注意事项都有哪些吗？让我们一起来看看吧！一、如何保存提取出的RNA？提取后溶解于RNase-freeWater中，RNA样品建议立即进行下游实验，如需储存，建议分装保存于-80℃。避免多次取用样品，反复冻融。二、为什么提取的RNA有降解？1.使用的组织材料不新鲜。提取RNA应采用新鲜的组织材料，或将新鲜组织材...

你知道PCR检测技术的分类吗？

2023-10-07 分子诊断技术是指以DNA和RNA为诊断材料，用分子生物学技术通过检测基因的存在、缺陷或表达异常，从而对人体状态和疾病作出诊断的技术。其基本原理是检测DNA或RNA的结构是否变化、量的多少及表达功能是否异常，以确定受检者有无基因水平的异常变化，对疾病的预防、预测、诊断、治疗具有重要意义。那么你知道PCR检测技术的分类吗？让我们一起来看看吧！PCR技术是一种用于扩增特定DNA片段的分子生物学技术，基本原理是在反应室中模拟细胞内的DNA复制，即人为创造核酸半保留复制条件，使目的DN...

内切酶实验的注意事项有哪些？

2023-10-07 你知道内切酶实验的注意事项有哪些吗？让我们一起来看看吧！一、限制性内切酶一般反应条件当进行限制性酶切反应时，为确保最佳的反应条件，务必要遵守限制性内切酶供应商提供的建议。在此过程中需要考虑的重要参数包括：底物(DNA)和酶的量、反应体积以及孵育时间。根据传统的定义，在最佳反应条件下，一个单位的限制性内切酶可以在1小时内，在50μL体系中wan全酶切1μL定义底物（例如，质粒pUC19）。尽管单位定义提供了一种测定方式，但还需注意，根据DNA底物之中的识别序列出现的频率及所用底...

荧光原位杂交实验的原理是什么？

2023-10-07 荧光原位杂交（FluorescenceinsituhybridizationFISH）是一门新兴的分子细胞遗传学技术，是20世纪80年代末期在原有的放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性原位杂交技术。目前这项技术已经广泛应用于动植物基因组结构研究、染色体精细结构变异分析、病毒感染分析、人类产前诊断、肿瘤遗传学和基因组进化研究待许多领域。那么你知道荧光原位杂交实验的原理是什么吗？让我们一起来看看吧！荧光原位杂交（Fluorescenceinsituhybridizat...